核酸提取 - 无锡微色谱生物科技有限公司

概述

从样本中纯化核酸是众多分子生物学应用中的关键步骤，使用 IMCStips 进行免手动自动化操作将有助于确保您所选用的自动化液体处理平台实现高效性和可靠性。

IMCStips 是基于移液器吸头的微型色谱柱，采用专利的分散固相萃取（dSPE）技术，可为您的微型样本（“微量制备”或“minipreps”）提供转染级质粒 DNA 纯化。我们专利的 dSPE 技术利用硅胶或强阴离子交换树脂，能够在更短时间内结合更多的分析物。通过将该步骤与尺寸排阻色谱缓冲液交换相结合，IMCStips 及我们的自动化专业知识为核酸纯化提供一站式解决方案。

优势

纯化 >10 µg 低内毒素质粒 DNA（~0.1 EU/µg），浓度 >100 ng/µL
从粗样品到脱盐质粒的全自动化流程，耗时不到 60 分钟
模板化工作流程，结合自动化离子交换色谱和尺寸排阻色谱
随附预编程软件脚本，配有直观的用户界面，可控制样本体积、吸液/分液循环和洗涤步骤

自动化质粒纯化产品
- μPure IMCStips
应用
- 核酸纯化或提取
- 自动化质粒 DNA 微量制备

PCR产物的自动化纯化
- 用于PCR纯化的IMCStips
- 用于PCR纯化的IMCStips试剂盒
应用
- PCR 纯化或 PCR 产物纯化

自动化低内毒素质粒纯化产品
- µPure LE IMCStips
- µPure LE 试剂盒
- µPure LE 试剂盒（含 SizeX)
应用
- 转染级质粒 DNA 纯化或提取
- 核酸纯化或提取
- 低内毒素质粒纯化

自动化中量制备规模质粒纯化产品
- MidiPure™ IMCStips
应用
- 质粒 DNA 纯化
- 中等规模纯化

µPure IMCStips® 采用分散固相萃取（dSPE）技术，提供可靠且自动化的解决方案，能够在不到 55 分钟内免手动处理多达 96 个样本。产量超过 10 μg，纯度与传统方法相当，同时相比传统磁珠试剂盒具有更高的回收率和纯度，确保结果一致且可靠。

不同质粒大小下质粒 DNA 纯化方法的比较分析。A）使用三种不同纯化方法（离心板、磁珠和 IMCStips ）分离的质粒 DNA 总产量（μg）。B）质粒 DNA 纯度，以 260/230 nm 吸光度比值表示，虚线标出的“预期”最佳纯度阈值为 2.0 至 2.3。C）260/280 nm 吸光度比值，作为 DNA 纯度的进一步指标，点代表单个样本，虚线标出最佳范围（1.8-2.0），该指标同样受纯化试剂盒影响。数据点按转化所用质粒大小着色（● 4k，● 5k，● 8k），误差棒反映标准差，突显每种纯化方法的可重复性。

离心板和 IMCStips® 在不同质粒大小下均产生了相似的纯度和产量，而基于磁珠的纯化方法经 NanoDrop 检测报告的结果偏高且不准确，可能是由于污染物所致。磁珠纯化的 260/280 nm 和 260/230 nm 吸光度比值未落在预期范围内，表明存在潜在的纯度问题。相比之下，凝胶分析证实离心板和 IMCStips® 提供了稳定的产量、纯度和超螺旋 DNA 含量。

吸头纯化（填充硅胶树脂的 1 mL IMCStips®）与离心板和磁珠纯化pDNA的比较。图 A 和 B 显示了 IMCStips、离心板和磁珠三种方法对两种质粒大小（4k和8k）各取 1 µL 洗脱 pDNA 的结果。图 C 和 D 显示了归一化凝胶电泳，用于直接比较各纯化方法，将 IMCStips 和离心板的体积调整为 3.75 µL，磁珠保持 1 µL，以使 pDNA 浓度均等。

µPure LE IMCStips® 采用分散固相萃取（dSPE）技术，用于低内毒素、转染级质粒DNA的高通量样本制备。吸头内填充有松散树脂，可在样本中分散，从而实现湍流混合并改善结合效果。该自动化工作流程使您能够在不到一小时内纯化多达 96 个样本。

使用 microPure LE IMCStips（吸头规格：1 mL）从质粒 + LB 培养基的过夜培养物中纯化质粒 DNA，随后用 SizeX100 IMCStips进行缓冲液交换至 1x TE缓冲液中。pCRS158、pCRS166 和 pCRS240.3 的平均质粒量分别为 14.6±1.3 μg、10.9±1.1 μg 和 11.3±1.1 μg（A及表格）。三种质粒的平均浓度均大于 100 ng/μL（B），而用 SizeX100 进行缓冲液交换后洗脱液体积范围为 90 μL 至 112 μL（C）。琼脂糖凝胶显示 pCRS158（蓝色）、pCRS166（红色）和 pCRS240.3（绿色）纯化后的质粒 DNA，分别为未加 BamHI（D）和加入 BamHI（E）的情况。

IMCStips 用于 PCR 产物纯化，基于双链 DNA 在离液盐存在下与硅胶树脂选择性结合的传统原理，并用低盐缓冲液洗脱。IMCStips 利用分散固相萃取方法，在自动化液体处理器的吸液和分液步骤中，于移液器吸头内快速分离目标分析物。该方法无需真空歧管、离心机或磁力板等辅助设备，从而简化了自动化流程。可在 30 分钟或更短时间内处理多达 96 个样本。

其中一个 PCR产物（608 bp）的 Sanger 测序结果。所有五个纯化产物均与测序兼容。

MidiPure™ IMCStips® 在 Dynamic Devices 平台上为自动化、高通量质粒 DNA 纯化提供了高效解决方案。该产品专为更大体积设计，使实验室能够将 5 mL 移液系统转化为中等规模纯化平台。这一从1 mL μPure IMCStips 方案升级而来的方案，使实验室能够处理多达 500 mL培养物，在不到两小时内每板分离出近 2.4 mg 质粒 DNA。

不同细胞密度下 pDNA 的产量和纯度（n = 4）。从 OD₆₀₀ 为 20 的样本中分离出 39±1 μg pDNA，从 OD₆₀₀ 为 30 的样本中分离出 41±4 μg pDNA。OD 为 50 的样本产量增至 55 μg pDNA，但 OD 80 和 100 的样本产量相近，分别为 66 和 68 μg pDNA。这表明 100 mg硅胶 MidiPure 更适合 OD 不超过 60 的样本，而 150 和 250 mg 硅胶 MidiPure 可用于更高载量。

MidiPure IMCStips与中量离心柱的质粒产量和纯度比较。一个 MidiPure IMCStips（每个吸头含 150 mg 硅胶）产出 117 ± 3 μg 质粒，而 Company A 的一个离心柱分离出 251 ± 9 μg。由于重悬、裂解和中和的体积是离心柱的两倍（IMCStips 最终体积为 58 mL，离心柱最终体积为 30.8 mL），因此 IMCStips 的产量与离心柱相比具有可比性，约为离心柱产量的一半。

应用文献

PO0037 自动化质粒纯化方案 ——— 无需辅助设备并减少人工干预

共 1 条，共 1 页

产品列表

适配工作站

Tecan

Hamilton

Analytik Jena

Opentrons

Integra

Dynamic Devices

Tip Size

5 mL

1250 µL

1 mL

300 µL

200 µL

标题	货号
MicroSep® IMCStips 核酸提取柱 (D20F) for Hamilton® CO-RE II®, WB 300 µL, Resin: Silica 3 mg , 96 支装	02-TK-H8 （D20F-3-96）
MicroSep® IMCStips 核酸提取柱 (D20F) for Hamilton® CO-RE II®, WB 300 µL, Resin: Silica 3 mg , 8 支装	02-TK-H8 （D20F-3-8）
MicroSep® IMCStips PCR Cleanup 套装 ( D20F with buffer) for Hamilton® , Resin Volume : 3 mg / 1 mL, 96 支装	02-TK-H3（D20F-3-Kit-3）
MicroSep® IMCStips 核酸提取套装 ( MicroPure LE R33 Kit ) for Hamilton® , Resin Volume : 25 uL / 1 mL, 96 支装	02-TK-H6 （R33-25-Kit-2）
MicroSep® IMCStips 核酸提取套装 ( MicroPure LE R33 Kit with SizeX) for Hamilton® , Resin Volume : 25 uL / 1 mL, 96 支装	02-TK-H6 （R33-25-Kit-1）
MicroSep® IMCStips 层析柱(R33) for Hamilton® , Resin Volume : 25 uL / 1 mL , 96 支装	02-TK-H6 （R33-25-96）
MicroSep® IMCStips 层析柱(R33) for Hamilton® , Resin Volume : 25 uL / 1 mL ,8 支装	02-TK-H6 （R33-25-8）

共 7 条，共 1 页

概述

优势

µPure

PCR Cleanup

µPure LE

MidiPure™