简介
胎粪通常被用来筛查新生儿体内的药物残留。药物通过胎儿排泄进胆汁及羊水后聚集在胎粪中,通常胎粪中药物的检测方法是免疫检测。为了能够提高样本的回收率同时减少胎粪的使用量,研究人员建立了一种激光二极管热脱附质谱(Laser Diode Thermal Desorption Mass Spectrometry,LDTD®-MS/MS)的方法,并对胎粪中26种滥用药物进行检测。LDTD离子源的激光二极管可对96孔板中的样品蒸发干燥,随后样品通过气流进入电晕放电区,可产生高效质子化作用和强烈的抗离子抑制反应。这个过程只需9秒。
材料与方法
1. 称量0.1 g胎粪,加入1 mL 0.1M磷酸缓冲液(pH7.0)。旋涡震荡并离心,用0.45 μm尼龙过滤器过滤。
2. 样本准备:110 μL胎粪溶液 + 5 μL内标溶液 + 20 μL IMCSzyme® + 25 μL快速水解缓冲液。旋涡震荡后于55℃水解15分钟。
3. 水解产物需进行液-液萃取(方法可能有所不同,取决于待测物的酸碱度)。
4. 将4 μL有机上层液转移至96孔LazWell™板中,干燥并进行LDTD-MS/MS分析。
结果
内标峰面积与待测物峰面积的比值用于定量计算。浓度与平均值的标准偏差(±2)用于绘制曲线。30个胎粪样本已经通过LC-MS/MS或GC-MS(ARUP实验室)进行了确认。LDTD-MS/MS能够全部检测待测物,且没有出现假阴性结果(表1)。
为了评估IMCSzyme®的水解效率,在胎粪中填加了等量的去甲羟基安定和去甲羟基安定葡萄糖苷酸。图表2所示,去甲羟基安定葡萄糖苷酸被完全水解。
结论
新型LDTD-MS/MS方法使得检测结果无假阴性。LDTD-MS/MS方法与IMCSzyme®联合使用,使得胎粪中药物水解更完全更高效,能在短时间内筛选26种不同的待分析物。
此项研究为IMCS总结于技术研究报告“Meconium Targeted Drug Screening in 9 seconds
per Sample Using Laser Diode Thermal Desorption Mass Spectrometry (LDTD-MS/MS)”(由Serge Auger - Phytronix发表于2016年ASMS)。
阅读原文
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